江苏省葫芦科作物6种病毒的多重 RT-PCR方法及应用

• 作者: 任春梅 周益军 杨柳 程兆榜 缪倩
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 葫芦科作物 病毒 多重RT-PCR
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 植物保护
• 页码范围: 756-763
• 页数: 8页
• 分类号: S436.421.1
• 字数: 6295字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.04.008

摘要

江苏省葫芦科作物上的病毒主要有小西葫芦黄花叶病毒( ZYMV)、西瓜花叶病毒( WMV)、黄瓜花叶病毒( CMV)、黄瓜绿斑驳花叶病毒( CGMMV)、烟草花叶病毒( TMV)和番木瓜环斑病毒( PRSV)，通常发生复合侵染。基于GenBank中这6种病毒的核苷酸序列保守区设计特异性引物，在单重RT-PCR技术的基础上，通过对影响2种多重RT-PCR扩增的DNA聚合酶浓度、dNTPs及镁离子浓度、退火温度、延伸时间、循环次数等因素进行优化，对检测灵敏度进行测定，建立了2种PCR反应同时检测葫芦科作物上6种病毒的多重RT-PCR方法。结果显示：2种多重RT-PCR体系均能同时扩增出各自特异性片段，测序分析结果表明序列同源性在97%以上；优化的2种多重RT-PC体系检测灵敏度为总RNA稀释102~103倍，应用于江苏省210份样品的检测结果与单重RT-PCR一致，体现了检测的可靠性；检测结果表明近年来江苏省葫芦科作物以种子传播的ZYMV和CGMMV侵染为主，病毒的复合侵染率达75.24%。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	程兆榜	江苏省农业科学院植物保护研究所	76	1073	20.0	29.0
2	任春梅	江苏省农业科学院植物保护研究所	27	246	10.0	14.0
3	周益军	江苏省农业科学院植物保护研究所	119	1884	25.0	37.0
4	缪倩	江苏省农业科学院植物保护研究所	12	77	6.0	8.0
5	杨柳	江苏省农业科学院植物保护研究所	6	14	2.0	3.0