摘要:
目的 探索牙髓干细胞(DPSC)在兔牙槽骨缺损再生修复中的作用,为临床上骨缺损的修复提供一定的理论基础.方法 (1)从新西兰幼兔(4周)前牙及磨牙牙髓组织中分离DPSC进行体外培养,测定细胞克隆形成率、抗Vimentin、抗CD44免疫组化染色,鉴定DPSC的增殖能力和多分化潜能的生物学特征.(2) 16只实验新西兰兔随机分为空白组,实验组两组,每组8只,均在动物下颌无牙区牙槽骨人工制备10mm×4mm×4mm骨缺损区,其中空白组骨缺损区填入浸有PBS溶液的0.25 g Bio-oss骨粉,实验组加入1×108/L的DPSC及0.25 g Bio-oss骨粉;于术后第6周同期处死动物,无菌获取牙槽骨组织,制作石蜡切片,HE染色及免疫组化检测骨涎蛋白(BSP).组间图像平均光密度比较采用两样本t检验.结果 (1)原代培养的幼兔牙髓细胞多呈成纤维细胞样细胞,少数纺锤形或多角形,光镜下传代培养的细胞形态特点与原代培养无明显差异;幼兔牙髓细胞体外多次传代仍具有良好的增殖能力;原代和次代克隆,免疫细胞化学对未经诱导的细胞进行表面标志物Vimentin、CD44鉴定,结果均为染色阳性.(2)术后6周,空白组HE染色可见少量红细胞,未见明显新骨生成,见少量成骨细胞;BSP免疫组化成弱阳性表现,图像平均光密度0.192±0.030.实验组HE染色提示炎性渗出明显吸收,可见新生骨组织,骨缺损区周围有大量成骨细胞,骨小梁较空白组致密,BSP免疫组化成强阳性表达,图像平均光密度0.258±0.035,与空白组相比,差异有统计学意义(P<0.05).结论 DPSC具有向成骨细胞分化的潜能,可促进牙槽骨缺损修复再生.