SOCS1在人骨髓间充质干细胞中的表达以及稳定表达SOCS1间充质干细胞株的建立

• 作者: 谢静仪 邹瑞丰
• 来源期刊: 标记免疫分析与临床
• 关键词: 人骨髓间充质干细胞 细胞因子信号转导抑制分子-1 Gateway
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 方法研究
• 页码范围: 562-568
• 页数: 7页
• 字数: 5136字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11748/bjmy.issn.1006-1703.2015.06.028

摘要

目的 探讨不同炎性因子刺激下细胞因子信号转导抑制分子-1(suppressor of cytokine signaling1,SOCS1)在人骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)中的表达情况,并研究稳定表达SOCS1的MSCs细胞株的建立方法.方法 用SOCS1相关炎性因子刺激剂处理24小时后裂解MSCs,Westen Blot检测各组细胞SOCS1的表达.通过Gateway技术,构建出表达SOCS1基因的载体质粒pFinal/PGK-puro-EF1 α-SOCS1-IRES-EGFP,将其与包装质粒共转染293FT细胞产生慢病毒,通过多次感染将载体导入人骨髓间充质干细胞,流式细胞术筛选出稳定表达SOCS1的人骨髓间充质干细胞,并用Westen Blotting、流式细胞术、成骨成脂肪诱导分化来鉴定.结果 SOCS1蛋白在IFN-γ、Pam3CSK4、Poly(I∶C)、LPS和ODN 2006刺激的MSCs中表达升高(P＜0.01).表达载体包装出的病毒感染后的MSCs中SOCS1蛋白水平提高,流式细胞检测表达(＞95％)CD29、CD44、CD73、CD90、CD105、CD166,不表达(＜2％)CD34和CD45,在相应诱导剂诱导下可分化为成骨细胞和脂肪细胞.结论 多种炎性因子能诱导MSCs内SOCS1表达升高,说明SOCS1可能参与了MSCs的免疫调节功能;成功建立了稳定表达SOCS1的MSCs细胞株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹瑞丰	中山大学干细胞与组织工程中心	1	1	1.0	1.0
5	谢静仪	暨南大学第二临床医学院深圳市人民医院龙华分院风湿免疫科	1	1	1.0	1.0