甘蓝型油菜 CRABS CLAW 基因克隆及其 RNA 干扰载体的构建

• 作者: 付三雄 周晓婴 张超 戚存扣 陈松
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 油菜 CRABS CLAW基因 RNA干扰载体
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 遗传育种?生理生化
• 页码范围: 737-742
• 页数: 6页
• 分类号: S565.4
• 字数: 4558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.04.005

摘要

CRABS CLAW( CRC)转录因子是YABBY基因家族成员,在植物花器官发育过程中起重要作用。为进一步研究CRC转录因子在调控油菜花器官发育过程中的作用,本研究以甘蓝型油菜品种宁油10号花蕾RNA为材料,通过反转录PCR克隆到1个580 bp长度的CRC基因,并利用pHurricane中间载体构建CRC基因的反向重复序列表达框,将CRC基因片段以正向的方式连接在1个可剪切的内含子的5忆末端,以反向的方式连接到该内含子的3忆末端；然后将CaMV35S启动子序列和CRC基因的反向重复表达框再克隆到植物双元载体 pCAMBIAI1390的pUC18多克隆位点,构建了干扰表达载体pA6-CRCi,经过酶切鉴定和测序分析,所构建的载体正确。