溶藻弧菌附着定植因子ACFA原核载体构建、表达条件优化及多克隆抗体制备

• 作者: 刘祥
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 溶藻弧菌 ACFA蛋白 正交试验 多克隆抗体
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 35-41
• 页数: 7页
• 分类号: Q816
• 字数: 4187字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7668/hbnxb.2015.01.007

摘要

为构建水产致病菌溶藻弧菌附着定植因子ACFA原核表达载体，优化ACFA蛋白的诱导表达条件，制备ACFA蛋白小鼠多克隆抗体。通过分子克隆获得ACFA蛋白的表达菌株，利用切胶纯化获得ACFA蛋白，免疫小鼠制备多克隆抗体，采用ELISA法检测抗体滴度为1∶3200倍， Western-Blotting法检测抗血清特异性较好。通过正交试验，获得ACFA菌株的最佳表达条件为：诱导时菌液OD600值0．5，加IPTG终浓度0．3 mmol／L，诱导时间8 h，诱导温度32℃；最佳培养条件为：葡萄糖浓度0，转速230 r／min，装液量50 mL。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘祥	陕西理工学院生物科学与工程学院	22	92	6.0	8.0