油菜薹中醚菊酯酶联免疫（ELISA）快速检测方法建立

• 作者: 张奇 张文 李培武 李敏 王恒玲
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 工学
• 关键词: 醚菊酯 多克隆抗体 酶联免疫吸附法 油菜薹(蔬菜)
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 测试与加工
• 页码范围: 354-359
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.5+3
• 字数: 4525字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2015.03.015

摘要

为快速有效监控蔬菜（油菜薹）醚菊酯农药残留，采用醚菊酯与牛血清白蛋白偶联物（ ethofenprox -BSA）抗原免疫新西兰大白兔获得抗醚菊酯多克隆抗体。以醚菊酯与卵清白蛋白偶联物（ethofenprox - OVA）为检测抗原，利用此抗体，进行间接竞争 ELISA 法试验。通过棋盘格实验确定了最佳抗原包被反应质量浓度为0.25μg/mL，最佳抗原包被条件为37℃孵育2h；一抗最佳稀释度为1：32000；最佳 pH 值与离子浓度分别为6.0和0.16mol/L；最佳封闭试剂与有机溶剂分别为脱脂奶粉和10%甲醇/ PBS。在此优化条件下，建立了醚菊酯竞争抑制曲线，抗体的灵敏度（IC50）为0.28μg/ mL，检测线性范围（IC20～ IC80）为0.0798～3.578μg/ mL。采用该方法对市场抽样进行加标回收测定，平均回收率在75.26%～97.56%之间，实际样品检测间接 ELISA 与 GC/ MS 检测结果相关性系数达到0.994，灵敏度、精密度和准确度均符合快速检测要求。该法为快速、简便、低耗的醚菊酯免疫检测方法提供了可能。