TGF-β通路调控椎间盘组织中胸腺基质淋巴细胞生成素表达的机制研究

• 作者: 付裕 方鑫 杨学军 祝勇 肖宇龙 苏秀兰 赵岩 邢文华 霍洪军
• 来源期刊: 中华骨科杂志
• 关键词: 转化生长因子β 椎间盘移位 淋巴细胞生成
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 基础与骨病
• 页码范围: 436-441
• 页数: 6页
• 字数: 5676字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0253-2352.2015.04.021

摘要

目的 探讨椎间盘组织中转化生长因子-β (transforming growth factor-β,TGF-β)通路调节胸腺基质淋巴细胞生成素(thymic stromal lymphopoietin,TSLP)表达的相关分子机制.方法 在体外培养小鼠椎间盘组织,用肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factora,TNF-α)模拟椎间盘突出时的炎症微环境,利用TGF-β通路的抑制剂或核因子-κB (nuclear factor-kappaB,NF-κB)抑制剂培养后,用ELISA法、免疫组化法及Western法测定椎间盘组织中TSLP的变化.结果 (1)TNF-α组的磷酸化NF-κB的阳性细胞率为92.4％±1.4％,对照组为9.4％±3.3％.加入TGF-β Ⅰ型受体抑制剂的HTS组磷酸化NF-κB的阳性细胞率为74.1％±6.7％;Western blot结果显示:HTS组和TNF-α组分别与对照组比较,表达磷酸化NF-κB明显增高,差异有统计学意义.(2)ELISA结果显示:HTS组表达TSLP为(482.8±44.5) pg/ml,对照组为(66.8±4.2) pg/ml,加入IMD和MG后,其表达TSLP下调.(3)TGF-β通路主要因子Smad 2/3的免疫组化结果显示:对照组中磷酸化Smad 2/3的阳性细胞率为46.6％±3.3％,HTS组为23.7％±10.9％,两者比较差异有统计学意义;Western blot结果显示:HTS组与对照组相比,表达磷酸化Smad 2/3明显下调.(4)ELISA结果显示:HTS组上调了TSLP的表达,MCP-1、IL-6均表达下调,MMP-3的表达无变化.结论 在生理条件下,椎间盘组织中内源性TGF-β通过抑制NF-κB的活性限制了TSLP的表达;当椎间盘突出时,内源性的稳态系统被打破,TGF-β活性下降或缺失,抑制NF-κB的能力下降,而后者促使TSLP生成增加,促进椎间盘突出重吸收.