2种诱导 iPSC 向神经干细胞分化方法的比较

• 作者: 刘华 杨坦 汪运山
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 诱导性多能干细胞 分化 神经干细胞
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 188-192
• 页数: 5页
• 分类号: R33-3
• 字数: 3587字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2015.01.035

摘要

目的：整体比较2种促进诱导性多能干细胞（ induced pluripotent stem cells ， iPSC）向神经干细胞（neural stem cells，NSC）分化的方法，确定一种稳定、高效的获得NSC的方法，并对NSC进行系统鉴定。方法：方法A：SB431542和drosomophorin的浓度均为5μmmol／L，诱导初始密度100％；方法B：SB431542的浓度为5 mmol／L， drosomophorin的浓度为1 mmol／L，诱导初始密度为40％。比较及鉴定方法：镜下观察诱导获得NSC的状态；real-time PCR比较神经干细胞相关基因Pax6、nestin、Sox1、Sox2等表达量；流式细胞术分析诱导第16天Pax6阳性率；免疫荧光定性分析神经干细胞相关蛋白的表达及其自发分化的能力。结果：方法A获得的NSC悬起后成球趋势明显，圆形，透明；方法B诱导获得NSC形状不规则，色灰暗。 Real-time PCR结果证明方法A诱导获得的细胞神经干细胞相关基因的表达量高于方法B。流式细胞术分析证明第16天，PAX6的阳性率，方法A高于方法B。经鉴定，方法A获得的神经干细胞高表达Pax6、nestin、Sox2等基因自发分化30 d，形成明显的神经纤维束，表达TUJ-1、MAP2及GFAP等神经元和胶质细胞的特异性标志物。结论：方法A整体优于方法B，我们推荐方法A作为诱导iPSC向神经干细胞分化的方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汪运山	山东大学附属济南市中心医院中心实验室	77	362	9.0	14.0
3	刘华	山东大学附属济南市中心医院中心实验室	29	57	5.0	5.0