利用子房滴注法获得转高亲和性钾离子转运蛋白基因(AlHAK1)棉花植株

• 作者: 刘晗 刘灵娣 吴立柱 唐宏亮 张书玲 杜环 董丽君 赵晓雅 高佳佳
• 来源期刊: 棉花学报
• 学科: 农学
• 关键词: 棉花 子房滴注转化 钾离子转运蛋白 转基因植株 钾营养 盐胁迫
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究与进展
• 页码范围: 9-15
• 页数: 7页
• 分类号: S562.035
• 字数: 4886字
• 语种: 中文

摘要

棉花植株再生困难、基因型依赖性强和转化周期长等因素一直制约着棉花遗传转化的发展.本研究利用1种不依赖组织培养的转化方法,即子房滴注转化方法将獐茅高亲和性钾离子转运蛋白基因(AlHAK1)导入棉花基因组中.结果表明在1006株转化幼苗中有44株为卡那抗性植株,其中35株经PCR检测为阳性(T0代),转化率为3.5％.Southern与Northern杂交结果进一步表明外源基因已整合至棉花基因组中并在转录水平上表达.在提供外源0.05 mmol·L-1 K+水平下,T1转基因棉花叶片中K+含量约为对照植株的2倍,在根中约为野生型植株的1.5倍;而在2.5 mmol·L-1 K+的正常水平下,转基因棉花与野生型植株K+含量差异不明显.在50～200 mmol·L-1 NaCl胁迫条件下,转基因棉花的种子发芽率明显高于野生型植株,尤其是在150mmol·L-1NaCl胁迫条件下,转基因植株种子的发芽率是野生型的2.8倍左右.本研究为子房滴注转化体系在生产实践中的广泛应用提供了理论依据,并为培育适应土壤钾素匮乏及盐渍化环境下生长的棉花新品种提供了新的种质资源.