高同型半胱氨酸血症通过内质网应激抑制ApoE敲除鼠肾脏CFTR的表达

• 作者: 周龙霞 张辉 张鸣号 杨晓玲 王艳华 田珏 赵丽 陈久凯 马文斌
• 来源期刊: 中国动脉硬化杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 高同型半胱氨酸血症 内质网应激 囊性纤维化跨膜转导调节因子
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 237-242
• 分类号: R363
• 语种: 中文

摘要

目的 探讨高同型半胱氨酸血症通过内质网应激抑制裁脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)鼠肾脏囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)的表达.方法 实验分组:正常对照组(n=6):选择健康5周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J),饲以正常饮食.另选5周龄雄性纯合子ApoE-/-鼠(SPF级近交系c57BL/6)18只,随机分为3组,每组6只:ApoE-/-对照组、高蛋氨酸组、干预组,分别给予正常饮食、高蛋氨酸饮食、高蛋氨酸饮食加0.006％叶酸及0.0004％维生素B12.喂养14周后眼球取血,分离血清,用酶联免疫吸附法检测血清同型半胱氨酸水平;实时定量荧光PCR检测小鼠肾脏CFTR、葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、活化转录因子6(ATF6)、蛋白激酶样内质网激酶(PERK)、C/EPB同源蛋白(CHOP) mRNA的表达以及免疫组织化学法检测小鼠肾脏CFTR蛋白的表达.结果 ApoE-/-对照组、高蛋氨酸组及干预组中血清同型半胱氨酸水平均增加,其中以高蛋氨酸组增加最显著(P＜0.01).实时定量荧光PCR结果显示,高蛋氨酸组CFTR mRNA的表达较正常对照组和ApoE-/-对照组显著降低(P＜0.01,P＜0.05),干预组CFTR mRNA的表达较高蛋氨酸组显著增加(P＜0.01);免疫组织化学法检测CFTR蛋白的表达与其mRNA的表达变化一致.高蛋氨酸组GRP78、ATF6、PERK、CHOP mRNA的表达较正常对照组和ApoE-/-对照组显著增加(P＜0.01),干预组GRP78、ATF6、PERK、CHOP mRNA的表达较高蛋氨酸组显著降低(P＜0.01).小鼠肾脏GRP78、ATF6、PERK、CHOP mRNA表达与CFTR mRNA表达的相关系数分别为:r=-0.7192,P ＜0.01;r=-0.5501,P＜0.01;r=-0.7772,P＜0.01;r=-0.6785,P＜0.01.结论 高同型半胱氨酸血症可能通过内质网应激抑制ApoE敲除鼠肾脏CFTR的表达.