发热伴血小板减少综合征病毒灭活病毒的纯化及免疫原性初步研究

• 作者: 刘林 张全福 张硕 李川 李德新 李阿茜 梁米芳
• 来源期刊: 病毒学报
• 学科: 医学
• 关键词: 发热伴血小板减少综合征病毒(SFTSV) 灭活病毒 分子筛层析 纯化 免疫原性
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 239-244
• 页数: 6页
• 分类号: R373.3+2
• 语种: 中文

摘要

为了解纯化后灭活发热伴血小板减少综合征病毒(Severe fever with thrombocytopenia syndrome bunyavirus,SFTSV)的免疫原性,本研究通过超滤浓缩和分子筛层析相结合的方法对灭活的SFTSV进行纯化,采用Western blot和SDS-PAGE对灭活病毒的纯化样品进行分析和鉴定,采用双抗夹心ELISA方法对其中糖蛋白(Glyeoprotein,GP)和核蛋白(Nucleoprotein,NP)的抗原含量进行检测.浓缩纯化的SFTSV火活病毒,经电镜观察并通过BCA法测定其总蛋白浓度.然后,将纯化的灭活SFTSV按两种不同的免疫程序免疫新两兰兔,评价免疫原性和比较免疫效果.结果显示,SFTSV灭活并超滤浓缩后,分子筛层析可观察到两个洗脱峰,其中之一为灭活病毒颗粒,SDS-PAGE、Western blot和ELISA法分析均可检测到GP和NP抗原,而另一洗脱峰主要成分则为NP.浓缩后的纯化病毒纯度达90％以上,总蛋白浓度约为1.1mg/mL,且具有典型的布尼亚病毒电镜形态.纯化的SFTSV灭活病毒免疫实验动物后,可在血清中检出高滴度病毒特异性IgG和中和抗体,但抗体滴度受免疫程序的影响,0d、14d和28d天三针程序免疫动物的效果明显优于0d、7d和28d免疫程序组.本研究显示了灭活SFTSV培养液中除完整病毒颗粒外,还含有大量游离的NP,经分子筛层析纯化可获得高纯度灭活病毒,同时明确了纯化的SFTSV灭活病毒具有良好的免疫原性,可诱导产生高滴度中和抗体和病毒特异IgG抗体,可为灭活病毒疫苗的进一步研究提供重要的线索.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	梁米芳		52	102	5.0	8.0
2	李德新		67	367	7.0	18.0
3	张全福		31	110	4.0	10.0
4	李川		38	55	4.0	6.0
5	刘林		7	23	2.0	4.0
6	张硕		21	35	3.0	5.0
7	李阿茜		11	28	3.0	5.0