农杆菌介导大豆子叶节遗传转化体系的优化

• 作者: 丁雪妮 廖文林 智海剑 翟锐 郑明洁 陆智文 高乐
• 来源期刊: 大豆科学
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 子叶节 农杆菌中文 转基因体系优化
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 遗传育种·分子生物学
• 页码范围: 768-775
• 分类号: S565.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.11861/j.issn.1000-9841.2015.05.0768

摘要

利用农杆菌菌株EHA105,对17个栽培大豆品种的大豆子叶节进行了侵染,从大豆基因型、氯气灭菌时间、外植体状态、菌株活力、侵染浓度、侵染时间、共培养时间等方面进行了优化.结果表明:氯气灭菌14～18 h,可在不影响大豆种子活力的同时最大限度的减少污染;暗处理1d的外植体活力高于光照处理5～7d的外植体;菌液浓度(OD600nm)在0.8 ～1.0且侵染浓度(OD600nm)为0.6～0.8时GUS瞬时表达率最高;适宜的侵染时间和共培养天数分别为30 min和4d.在上述优化研究基础上,形成一套综合的转基因体系,该体系的最高转化率可达3.33％.不同处理下的GUS瞬时表达率以及17个大豆品种的丛生芽诱导率综合评价显示,适宜转化的基因型为TL-1、HC-3、HC-6、Wil-liams 82.