我国罗非鱼源新型无乳链球菌的分离、鉴定及其分子特征

• 作者: 任燕 刘礼辉 吴淑勤 张德锋 李宁求 林强 潘厚军 石存斌
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 罗非鱼 无乳链球菌 分子分型 致病性
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 1044-1054
• 页数: 11页
• 分类号: S941|Q938.8
• 字数: 7263字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2015.15127

摘要

2014年海南省文昌市多个养殖场的罗非鱼出现暴发性疾病，患病罗非鱼表现出体色发黑、打转游动、眼球突出或混浊等典型的链球菌病症状。从患病罗非鱼的肝、肾、脾、眼球和脑等组织中分离到19株病原菌，即TC-1、TC-2、BL1441~BL1448和WT1451~WT1459。通过形态观察、生理生化特征和16S rRNA基因序列分析等方法对病原菌进行鉴定，结果表明，这些病原菌均为无乳链球菌。溶血试验结果表明， TC-1、TC-2和BL1441~BL1448菌株为β-溶血性无乳链球菌，而 WT1451~WT1459菌株为不溶血无乳链球菌。进一步通过 MLST、分子血清型和毒力相关基因检测等技术对这些分离菌株进行遗传特征分析，结果表明TC-1、TC-2和BL1441~BL1448菌株是常见的 Ia-ST7型，其毒力基因型为 bac+-bca+-bibA+-cfb+-hylB+-iagA+-fbsB+-lmb–-scpB–-cylE+-gbs20186–。而 WT1451~WT1459菌株则是Ib-ST261型，其毒力基因型为bac–-bca–-bibA+-cfb+-hylB+-iagA+-fbsB+-lmb–-scpB–-cylE–-gbs20186+。将分离菌株 BL1441和 WT1451分别对罗非鱼进行攻毒试验，结果表明， WT1451菌株是强毒株，当其攻毒剂量为4.5×103 CFU/mL 时，罗非鱼累积死亡率可达85%。本研究将为我国罗非鱼无乳链球菌的流行病学、疫苗研制以及疾病防控等研究奠定基础。