鮰爱德华氏菌外膜微孔蛋白N基因PCR快速检测方法的建立

• 作者: 吉莉莉 杨洁 汪开毓 潘延乐 耿毅 阳磊 陈德芳
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 农学
• 关键词: 鮰爱德华氏菌 外膜微孔蛋白基因 PCR
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 基础资料
• 页码范围: 264-269
• 页数: 6页
• 分类号: S947
• 字数: 4322字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2015.02.017

摘要

根据GenBank中鮰爱德华氏菌Edwardsiella ictaluri外膜微孔蛋白N(porinN)基因序列(GenBank No:NC_012779.2)设计了1对引物,预计目的片段大小为381 bp.通过对反应体系和条件的优化,并进行特异性试验、敏感性试验及人工感染组织样品检测,建立了一种快速检测鮰爱德华氏菌的PCR方法.结果表明,在所检测的鮰爱德华氏菌、迟缓爱德华氏菌、嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、杀鲑气单胞菌、豚鼠气单胞菌、嗜麦芽寡养单胞菌、鲁氏耶尔森氏菌、海豚链球菌、不动杆菌、产气肠杆菌、大肠杆菌、拟态弧菌、荧光假单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌15种细菌中仅鮰爱德华氏菌扩增出特异性条带;敏感性试验结果显示,该方法最小核酸检出量为9.35×10-3 ng·μL-1;同时对人工感染的病料肝脏、细菌基因组DNA、细菌菌液及菌落进行扩增,结果显示4种材料均能检测出大小为381 bp的基因片段.本研究所建立的方法特异强、灵敏度高,适用于鮰爱德华氏菌感染病例的高效、快速检测.