枸杞酸性转化酶基因的克隆与表达

• 作者: 安巍 尹跃 李浩霞 王亚军 王华芳 石志刚 赵建华
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 枸杞 酸性转化酶 基因克隆 表达 可溶性糖
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 园艺
• 页码范围: 1140-1148
• 页数: 9页
• 分类号: S567|Q785
• 字数: 5588字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2015.05.031

摘要

以枸杞果实为试验材料,利用RACE技术克隆枸杞酸性转化酶基因LbAI的全长cDNA序列,应用生物信息学软件分析LbAI预期编码蛋白质特征；采用气相色谱法和实时荧光定量PCR 技术,分析不同发育阶段枸杞果实及不同颜色成熟果实中可溶性糖含量及LbAI 在果实中的相对表达量。结果显示：LbAI 的cDNA 序列全长2252 bp,开放阅读框(ORF)长1920 bp,编码642个氨基酸,LbAI编码的蛋白质相对分子量和等电点(pI)分别为70600和5.9,GenBank 登录号为KM191309。进化树分析结果显示,枸杞与马铃薯和番茄的亲缘关系最近,相似性在85%以上。随着果实生长发育,枸杞果实中果糖和葡萄糖含量不断升高,而蔗糖呈现出降低趋势；不同颜色枸杞果实中糖含量差异较大,成熟红色和黄色果实中果糖和葡萄糖含量显著高于黑色果实,但蔗糖含量在黑色果实中最高,在红色果实中最低；LbAI相对表达与果实中葡萄糖含量变化基本一致。表明LbAI基因在枸杞果实糖积累过程中具有重要的作用。