外源性一氧化碳释放分子2体外干预内毒素/脂多糖致健康人血小板过度活化的研究

• 作者: 刘大东 孙炳伟 庄明峰 张景丽 陈静家
• 来源期刊: 中华烧伤杂志
• 关键词: 脓毒症 血小板 外源性一氧化碳释放分子2 糖原合酶激酶3β
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 354-360
• 页数: 7页
• 字数: 6041字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1009-2587.2015.05.010

摘要

目的 探讨外源性一氧化碳释放分子2(CORM-2)对LPS所致健康人外周血中血小板过度活化的作用及分子机制.方法 采集1名健康成年人的静脉血,离心分离出富血小板血浆(PRP),分装于硅化后的试管,按随机数字表法分为正常对照组、LPS组、无活性CORM-2(iCORM-2)组、10 μmol/L CORM-2组、50 μmol/L CORM-2组,每组3管.正常对照组不进行任何处理;LPS组接受20 mL 10 μg/mL的LPS刺激;iCORM-2组、10 μmol/L CORM-2组、50 μmol/L CORM-2组在接受上述LPS刺激的同时分别接受50 μmol/L iCORM-2、10μmol/L CORM-2、50 μmol/L CORM-2的干预,用量均为20 mL.培养30 min后玻瓶法检测血小板黏附率;免疫荧光法检测血小板侵袭至纤维蛋白原的数量;比浊法检测血小板聚集率;取PRP制备贫血小板血浆(PPP)及血小板,化学荧光素法检测PPP及血小板内ATP含量;流式细胞仪检测血小板膜糖蛋白(GP)Ⅰ bα和GPⅥ表达;蛋白质印迹法、免疫沉淀法分别检测血小板糖原合酶激酶3β (GSK-3β)及磷酸化GSK-3β表达.以上指标均重复测定3次.对数据行单因素方差分析、SNK检验.结果 与正常对照组比较,LPS组、iCORM-2组PRP中血小板黏附率、侵袭至纤维蛋白原上的血小板数量、血小板聚集率、血小板GP Ⅰ bα和GPⅥ表达量及PPP中ATP含量均明显增加,血小板内ATP含量均明显减少,P值均小于0.05.与LPS组比较,iCORM-2组上述各指标无明显变化(P值均大于0.05);10 μmol/L CORM-2组、50 μmol/LCORM-2组血小板内ATP含量明显增加,其余上述各指标均明显减少,P值均小于0.05.正常对照组、LPS组、iCORM-2组、10 μmol/L CORM-2组、50μmol/L CORM-2组PRP中血小板GSK-3β表达量分别为0.550±0.060、1.437 ±0.214、1.210±0.108、0.720 ±0.010、0.670 ±0.010,磷酸化GSK-3β表达量分别为0.950±0.070、1.607±0.121、1.420±0.040、1.167±0.015、0.513 ±0.122.LPS组、iCORM-2组PRP中血小板GSK-3β表达量及磷酸化GSK-3β表达量较正常对照组明显增加(P值均小于0.05),iCORM-2组PRP中血小板GSK-3β表达量及磷酸化GSK-3β表达量与LPS组相近(P值均大于0.05),10 μmol/L CORM-2组、50μmol/L CORM-2组PRP中血小板GSK-3β表达量及磷酸化GSK-3β表达量较LPS组明显减少(P值均小于0.05).结论 LPS刺激可致健康人外周血中血小板异常活化,CORM-2的干预能够有效地抑制血小板的过度活化,其机制可能涉及GP介导的GSK-3β的磷酸化.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙炳伟	江苏大学附属医院整形科	58	264	9.0	12.0
2	陈静家	江苏大学附属医院整形科	8	30	3.0	5.0
3	庄明峰	江苏大学附属医院整形科	6	14	3.0	3.0
4	张景丽	江苏大学附属医院整形科	1	3	1.0	1.0