改良差时贴壁法分离培养鉴定小鼠骨髓间充质干细胞和内皮前体细胞

• 作者: 冯文磊 印双红 吴向未 张猛 徐芳洁 王艳杰 陈雪玲
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 间充质干细胞 内皮前体细胞 骨髓 改良差时贴壁分离法 流式细胞术 小鼠
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 282-288
• 分类号: R392.12
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2015.02.023

摘要

目的 探索同时从小鼠骨髓分离培养间充质干细胞(MSCs)与内皮前体细胞(EPCs)及对其鉴定的方法.方法 小鼠骨髓细胞经改良差时贴壁法分离,以48h为时间点,48h内贴壁细胞传至3代后行成骨、成软骨、成脂分化诱导实验,流式细胞术(FCM)检测其表面标记;48h后收集未贴壁细胞,传至3代后行血管形成实验,传至5代后行CD31免疫荧光细胞染色实验,FCM检测其表面标记.结果 第3代48h内贴壁细胞可诱导分化为骨、软骨和脂肪细胞,FCM检测Sca-1、CD29、CD45、CD11b阳性率分别为(98.30 ±0.75)％,(97.47±1.32)％,(1.87±0.15)％,(1.03±0.71)％;第3代48h后贴壁细胞在基质胶上可形成血管样结构,第5代48h后贴壁细胞特异性表面抗原CD31呈阳性表达,FCM检测CD34、CD133、血管内皮生长因子受体(VEGFR2)阳性率分别为(88.90±1.18)％,(92.73 ±2.90)％,(87.63±1.79)％.结论 采用改良差时贴壁法可同时分离培养扩增小鼠骨髓MSCs和EPCs,且简便高效稳定可重复.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴向未	石河子大学医学院	60	211	9.0	12.0
2	陈雪玲	石河子大学医学院	44	188	8.0	12.0
3	印双红	石河子大学医学院	5	26	3.0	5.0
4	张猛	石河子大学医学院	7	50	5.0	7.0
5	冯文磊	石河子大学医学院	5	50	5.0	5.0
6	徐芳洁	石河子大学医学院	7	52	5.0	7.0
7	王艳杰	石河子大学医学院	5	50	5.0	5.0