粮油产品T-2毒素单克隆抗体研制及应用

• 作者: 张亮 张奇 张文 朱建国 李培武 杨青青
• 来源期刊: 中国油料作物学报
• 学科: 工学
• 关键词: T-2毒素 单克隆抗体 间接竞争ELISA 检测
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 测试与加工
• 页码范围: 724-729
• 页数: 6页
• 分类号: TS207.4
• 字数: 5068字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7505/j.issn.1007-9084.2015.05.021

摘要

以T-2毒素与琥珀酸为原料,通过琥珀酸酐法合成出T-2毒素半抗原T-2HS,再通过活泼酯法,将T-2毒素半抗原分别与牛血清蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)共价偶联,合成出T-2毒素人工抗原T-2HS-BSA和T-2HS-OVA,以T-2HS-BSA作为免疫原,免疫Balb/c小鼠,经细胞融合和阳性筛选,共获得4株T-2毒素单克隆抗体杂交瘤细胞株,分别是1D6、2A8、2C5和4G3.其中2C5分泌的抗体灵敏度(IC50)最高,达0.13 μg/kg,特异性强,与HT-2的交叉反应率仅为4％,与FB1、DON、ZEN无交叉反应.进一步利用该抗体建立了间接竞争ELISA检测方法,最低检测限为0.015 μg/kg,检测范围(IC20～ IC80)为0.05 ～57.6μg/kg,该方法对大豆、玉米、花生等粮油产品的检测范围为0.5～ 576 μg/kg,在线性范围内加标回收率为93.5％ ～ 107.5％.本研究建立的检测方法可用于大豆、玉米、花生等多种粮油产品中T-2毒素的检测.