用高度特异性王浆主蛋白1多克隆抗体 ELISA法检测蜂王浆新鲜度

• 来源期刊: 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）
• 学科: 农学
• 关键词: 新鲜度 蜂王浆 王浆主蛋白 1 ELISA 高度特异性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 页码范围: 155-166
• 页数: 12页
• 分类号: S896.8
• 语种: 英文
• DOI: 10.1631/jzus.B1400223

摘要

目的：为蜂王浆主蛋白1（MRJP1）的快速检测和鉴别提供科学依据，为蜂王浆的质量控制提供技术支持。<br>　　创新点：首次比较了MRJP1特异性多克隆抗体与MRJP1重组表达蛋白多克隆抗体对王浆主蛋白家族的免疫反应差异，验证了蜂王浆中 MRJP1蛋白降解与保温时间的相关性，建立了以 MRJP1作为蜂王浆新鲜度生物标志物的快速检测方法。<br>　　方法：通过蜂王浆主蛋白家族蛋白的氨基酸序列同源性分析，筛选出 MRJP1的特异性多肽区域，进行人工合成，免疫兔子后取血清制备成特异性多克隆抗体。用蛋白质印迹法（Western blot）检测了MRJP1特异性多克隆抗体与 MRJP1重组表达蛋白多克隆抗体对王浆主蛋白家族的免疫反应。以新鲜蜂王浆为对照品，用 MRJP1特异性抗体酶联接免疫吸附剂测定（ELISA）法和变性电泳胶灰度扫描法分别测定保温（40°C）7～49天的蜂王浆中 MRJP1含量的变化，并进行了相关性分析。<br>　　结论：MRJP1的特异性抗体对 MRJP1蛋白具有专一的免疫识别特性，可特异性地检测代表蜂王浆新鲜度的MRJP1含量变化，并鉴别蜂王浆的真伪。