早熟马铃薯ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

• 作者: 何新民 何海旺 何虎翼 唐洲萍 李丽淑 王晖 谭冠宁
• 来源期刊: 广东农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 马铃薯 ISSR 反应体系优化 引物筛选
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 133-137
• 页数: 5页
• 分类号: Q946.2|S532
• 字数: 3356字
• 语种: 中文

摘要

为得出马铃薯ISSR-PCR最佳的反应体系,采用正交试验设计,对rTaq DNA聚合酶、Mg2+、模板DNA、dNTPs和引物进行5因素4水平筛选.结果表明,马铃薯ISSR-PCR的最佳反应体系为:总体积25 μL的反应体系中含有rTaq DNA聚合酶0.5 U、Mg2+浓度为2.5 mmol/L、模板DNA用量为75 ng、dNTPs浓度为200 μmol/L、引物浓度为0.8 μmol/L.这些因素对PCR反应的影响大小顺序为Mg2+浓度＞rTaq DNA聚合酶用量＞dNTPs浓度=引物浓度＞模板DNA用量.应用该最佳反应体系对39条ISSR引物进行筛选,得出15条条带清晰、条带数多、重复性好的引物.并通过退火温度梯度试验得出筛选引物的最佳退火温度.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	何新民	广西农科院经济作物研究所	8	107	5.0	8.0
2	唐洲萍	广西农科院经济作物研究所	5	29	3.0	5.0
3	何虎翼	广西农科院经济作物研究所	2	2	1.0	1.0
4	谭冠宁	广西农科院经济作物研究所	5	17	2.0	4.0
5	李丽淑	广西农科院经济作物研究所	4	55	2.0	4.0
6	王晖	广西农科院经济作物研究所	3	10	2.0	3.0
7	何海旺	广西农科院经济作物研究所	5	31	3.0	5.0