肺癌循环肿瘤细胞的单细胞EGFR基因突变检测

• 作者: 孙帅 邓宇亮
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: 循环肿瘤细胞 微流控芯片 单细胞基因突变检测 EGFR
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 页码范围: 1251-1257
• 页数: 7页
• 字数: 4233字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16288/j.yczz.15-130

摘要

循环肿瘤细胞（Circulating tumor cells，CTCs）是从肿瘤原发病灶脱落并侵入外周血循环的肿瘤细胞。由于CTCs存在较大的异质性，其与癌症发展转移密切相关，但目前尚缺乏有效的CTCs单细胞异质性检测方法。鉴于此，本文发展了在单细胞层面对 CTCs 进行基因突变的检测方法并用于单个肺癌 CTC 的 EGFR （Epidermal growth factor receptor）基因突变检测。首先用集成式微流控系统完成血液中稀有CTCs的捕获，接着将CTCs释放入含有多个微孔的微阵列芯片中，得到含有单个CTC的微孔，通过显微操作将单个CTC转入 PCR管内完成单细胞基因组的放大，并进行单细胞的 EGFR基因突变检测。以非小细胞肺癌细胞系 A549、NCI-H1650和 NCI-H1975为样本，通过芯片与毛细管修饰、引物扩增条件（复性温度、循环次数）的优化，结果显示在复性温度59℃、30个循环次数的条件下，引物扩增效果最优。利用该方法成功地对非小细胞肺癌（Non-small cell lung cancer, NSCLC）患者的血液样本进行了测试。从患者2 mL血液中获取5个CTCs，分别对其 EGFR基因的第18、19、20、21外显子进行测序，发现该患者 CTCs均为 EGFR野生型。研究结果证明此检测方法可以灵敏地用于单个CTC基因突变的检测，在临床研究上具有重要的指导意义。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邓宇亮	上海交通大学系统生物医学研究院	5	22	2.0	4.0
2	孙帅	上海交通大学系统生物医学研究院	1	9	1.0	1.0