绵羊 ARHGAP36全长 cDNA 的克隆及其蛋白在睾丸精细管中的分布检测

• 作者: 王连庆 白雪 邢万金
• 来源期刊: 生物学杂志
• 学科: 农学
• 关键词: 绵羊 ARHGAP36 cDNA克隆 RACE 免疫组织化学
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1-7,32
• 页数: 8页
• 分类号: Q751|S826
• 字数: 7409字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1736.2015.02.001

摘要

ARHGAP36是Rho GAPs家族的一员，在成神经管细胞瘤中超表达，可能参与调节细胞增殖。为了研究ARHGAP36在羊精子发生过程中的作用，采用RACE（ rapid amplification of cDNA ends ）技术从绵羊睾丸组织中克隆了SARHGAP36的cDNA全长序列。内部区域cDNA序列与5′RACE 和3′RACE扩增的两端序列测序后拼接，得到了2698 bp的绵羊ARHGAP36 cDNA全长，其中包含一个长1593 bp的开放阅读框（ ORF），编码530 aa，与UniProt中预测的牛ARHGAP36氨基酸序列（A7MB27）同源性为98％，说明我们克隆的cDNA是Rho GAP家族的成员ARH-GAP36。对所克隆的绵羊ARHGAP36的氨基酸序列和UniProt数据库中所收集的所有其它ARHGAP成员的氨基酸序列比对分析显示，ARHGAP36没有其它ARHGAP成员都有的标志性“精氨酸指”基序，而它的对应基序中的保守精氨酸残基被苏氨酸替代了，暗示ARHGAP36很可能并不依靠酶催化活性发挥其功能。当把所克隆的cDNA与GenBank中发布的绵羊ra hgap36序列比对时发现绵羊arhgap36基因组测序结果的第一个外显子中缺少一小段DNA，导致如果用该基因组序列预测绵羊ARHGAP36的cDNA，无法得到能编码正确氨基酸的cDNA，因此，实验为进一步研究ARHGAP36这个特殊ARHGAP成员的功能提供了正确的cDNA序列。绵羊睾丸总蛋白Western blot检测发现绵羊睾丸内的ARHGAP36有3种长度，免疫组织化学检测发现ARHGAP36蛋白在绵羊睾丸精细管中的精子发生过程中各类细胞中都有分布。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邢万金	内蒙古大学生命科学学院	43	217	9.0	13.0
2	白雪	内蒙古大学生命科学学院	14	33	3.0	5.0
3	王连庆	内蒙古大学生命科学学院	2	10	1.0	2.0