绿色荧光蛋白在α-1,3半乳糖基转移酶敲除猪组织器官的表达分析

• 作者: 冯冲 宋小凤 李智方 杨小淦 潘登科 石宁宁 纪慧丽 赵勤丽 龙川
• 来源期刊: 遗传
• 关键词: GTKO 增强型绿色荧光蛋白 猪 异种移植
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 页码范围: 1211-1217
• 页数: 7页
• 字数: 3225字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16288/j.yczz.15-160

摘要

猪是人类异种器官移植的理想供体，然而猪-人的异种器官移植会产生剧烈的排斥反应。虽然已制备的α-1,3半乳糖基转移酶基因敲除（Galactosyltransferase gene knockout, GTKO）猪可有效缓解猪-人异种器官移植引起的超急性免疫排斥，但缺少报告基因直观示踪移植后的细胞迁移及器官排斥状态。本文将 CAG启动子驱动增强型绿色荧光蛋白（Enhanced green fluorescent protein, EGFP）的表达载体导入GTKO猪耳成纤维细胞，通过体细胞核移植技术制备了 EGFP 猪。利用双荧光蛋白观测镜、荧光显微镜及定量 PCR 扩增观察、检测和分析克隆猪各组织器官中EGFP蛋白和转录本的表达状况。结果显示，EGFP蛋白及转录本在克隆猪各组织器官中均有表达，但在肝脏和中枢神经系统中表达较弱。本文成功获得了各组织器官表达EGFP的GTKO猪，为EGFP示踪异种细胞组织移植奠定了基础。