普定高脚鸡甲状旁腺激素相关蛋白基因PTHrP多态性及组织差异表达分析

• 作者: 孙鹃 张勇 张雄 彭松 李俊 杨红 裘贵华
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 关键词: 高脚鸡 PTHrP基因 PCR-SSCP 荧光定量PCR 多态性 差异表达
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 研究论文与报告
• 页码范围: 1084-1092
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2015.08.012

摘要

为揭示普定高脚鸡甲状旁腺激素相关蛋白基因(parathyroid hormone-related peptide gene,PTHrP)的遗传多样性及其在各组织中的差异表达,本实验以贵州省特有的高脚鸡为实验材料,矮脚鸡和百宜黑鸡作对比,利用DNA池、单链构象多态性(single strand conformation polymorphim,SSCP)和DNA测序技术对高脚鸡PTHrP进行了多态位点检测;采用实时荧光定量PCR技术对PTHrP在高脚鸡、矮脚鸡和百宜黑鸡的心脏、肝脏、胸肌、腿肌中的差异表达进行了分析.结果表明,高脚鸡PTHrP在第3外显子209 bp处发生了C→T突变,为同义突变,SSCP检测出3种基因型CC、CT和TT,相关分析显示C209T多态位点对高脚鸡胫长具有显著影响,且CT基因型个体胫长均显著高于CC和TT基因型个体(P＜0.05),经X2适合性检验表明高脚鸡群体呈现中度多态(PIC=0.350),并处于Hardy-weinberg平衡状态(P＞0.05);RT-PCR检测显示PTHrP在高脚鸡腿肌中表达量最高,且显著高于其他组织(P＜0.05);在与矮脚鸡、百宜黑鸡比较中,高脚鸡各组织中的表达量均高于百宜黑鸡相应组织表达量(P＜0.05),但均低于矮脚鸡相应组织表达量(P＜0.05).研究结果提示,PTHrP基因多态性与高脚鸡胫长显著相关,可尝试用CT基因型为筛选高脚鸡胫长的分子标记辅助选择,且PTHrP的表达量在一定程度上对鸡胫骨长度具有影响作用.