利用乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA构建慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型

• 作者: 严磊 李小松 王会娟 谭毅 赖国旗 赵婷婷 黄爱龙
• 来源期刊: 四川动物
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 HBV共价闭合环状DNA 水动力法 小鼠模型
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 200-207
• 页数: 8页
• 分类号: Q95-33|R512.6
• 字数: 5165字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-7083.2015.02.007

摘要

目的 通过水动力法注射乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA(cccDNA)构建C57BL/6小鼠慢性乙型肝炎病毒感染的模型.方法 取29只C57BL/6小鼠,分为实验组、对照组和空白组,应用水动力法分别注射HBVcccDNA、pAAV-HBV1.2及等渗盐水,于注射后收集不同时间点的血清和肝组织.利用放射免疫法检测血清样本中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg);荧光定量PCR检测血清和肝组织中HBV DNA拷贝数;免疫组织化学法检测肝组织中HBsAg和乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)的表达;苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;使用SPSS 17.0对数据进行统计学分析.结果 实验组HBsAg和HBeAg表达均呈现4个上升-下降曲线:HBsAg峰值分别出现在第3天、第3周、第7周和第9周;HBeAg峰值分别出现在第1天、第1周、第4周和第10周.对照组HBsAg和HBeAg表达分别呈现2个或3个明显的峰:HBsAg峰值分别出现在第3天和第8周;HBeAg峰值分别出现在第1天、第3周和第10周.空白组未检测出HBsAg和HBeAg.实验组HBV DNA拷贝数高于对照组的拷贝数(P＜0.01);肝组织中HBV DNA拷贝数高于同期血清中的拷贝数(P＜0.01);实验组和对照组的肝组织中均有HBsAg和HBcAg的表达;实验组与对照组出现肝脏细胞炎症、肝细胞纤维化、肝细胞坏死等病理变化,而空白组正常.结论 利用水动力法向C57BL/6小鼠体内转入HBV cccDNA,成功建立了慢性乙型肝炎病毒感染的小鼠模型,与对照组比较,新建立的小鼠乙肝模型具有更高的HBV表达,动物模型为研究乙型肝炎病毒HBVcccDNA的感染及其引起肝损伤的机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谭毅	重庆医科大学实验动物中心	93	504	10.0	18.0
2	黄爱龙	重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室	236	1190	16.0	23.0
3	赖国旗	重庆医科大学实验动物中心	61	250	8.0	12.0
4	严磊	重庆医科大学实验动物中心	6	50	2.0	6.0
5	赵婷婷	重庆医科大学实验动物中心	10	16	2.0	3.0
6	李小松	重庆医科大学感染性疾病分子生物学教育部重点实验室	4	12	2.0	3.0
7	王会娟	重庆医科大学实验动物中心	6	8	2.0	2.0