同步接毒条件下鳜传染性脾肾坏死病毒在CPB细胞中的最适增殖条件

• 作者: 付小哲 张悠 李宁求 林强 罗霞 黄志斌
• 来源期刊: 水产学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鳜 传染性脾肾坏死病毒 鳜脑细胞 同步接毒 荧光定量PCR 增殖条件
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 页码范围: 1712-1720
• 分类号: S941
• 语种: 中文
• DOI: 10.11964/jfc.20150409817

摘要

为了获知鳜传染性脾肾坏死病毒(ISKNV)同步接毒最适增殖条件,通过检测不同血清浓度、病毒接种量、细胞状态等培养条件下的病毒拷贝数,确定鳜脑组织细胞(CPB)同步接种ISKNV的最适体外增殖条件.结果表明,上述各因素对ISKNV的增殖量均有明显影响.其中选取处于对数生长中期的CPB细胞,胰酶消化后按照病毒感染复数(MOI)为0.2同步接种ISKNV,培养液中胎牛血清终浓度为6％时,28℃恒温培养9d后收获,所得病毒拷贝数最多,为2.54×108拷贝/mL.将所测得病毒拷贝数折算成培养基成本进一步分析表明,按照上述相同条件进行接毒,每元人民币培养基所得病毒量也最高,为4.24×1011拷贝.综上所述,本研究基于病毒增殖量及培养基成本对病毒增殖条件进行优化,可为低成本ISKNV疫苗的生产提供理论依据.