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可活化细胞穿膜肽-聚N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-Ad.mda-7.egfp接合物的合成及跨膜运输途径检测
可活化细胞穿膜肽-聚N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-Ad.mda-7.egfp接合物的合成及跨膜运输途径检测
作者:
刘谕昆
张雅洁
李书华
李灏
许泽鹏
陈婷婷
陈艺瑛
马少丹
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
可活化细胞穿膜肽
N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
腺病毒
蛋白质转运
摘要:
目的:合成一种由可活化细胞穿膜肽(ACPP)、水溶性高分子聚合物聚N?(2?羟丙基)甲基丙烯酰胺(pHPMA)修饰腺病毒的接合物,并初步探索该接合物的跨膜运输途径。方法通过化学合成的方法合成ACPP。将肺腺癌细胞株A549、乳腺癌细胞株MDA?MB?231、肺支气管上皮细胞株HBE和肝癌细胞株HepG2均分为两组,分别加入培养基及终浓度为10 mg/L基质金属蛋白酶抑制剂强力霉素,12 h后加入ACPP,通过荧光显微镜观察并鉴定ACPP对各细胞的穿膜活性。通过化学修饰法合成接合物pc?Ad. mda?7.egfp及ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp,通过荧光显微镜观察并初步鉴定接合物的合成和对A549细胞的穿膜活性。应用流氏细胞术检测接合物感染A549细胞的能力。通过荧光显微镜观察并鉴定接合物ACPP?pc?Ad. mda?7. Egfp在A549细胞内定位及穿膜活性。结果合成了ACPP 100 mg。ACPP对A549、MDA?MB?231、HepG2细胞株具有靶向性穿膜活性,而HBE细胞内未见绿色荧光,强力霉素组细胞经过强力霉素作用后与ACPP?FITC孵育,4种细胞内均未见明显绿色荧光反应,强力霉素阻断了ACPP的肿瘤选择性穿膜作用。合成了两种接合物pc?Ad.mda?7.egfp(粒径420.6 nm)及ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp(粒径462.2 nm)。将ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp、pc?Ad.mda?7.egfp接合物、Ad.mda?7.egfp与A549细胞共培养后,可见空白对照组(培养基)无绿色荧光蛋白表达,pc?Ad.mda?7.egfp接合物仅见微量绿色荧光蛋白表达,ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp、Ad.mda?7.egfp组所有细胞均可见强烈绿色荧光蛋白表达。经流氏细胞仪检测,ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp组A549细胞PI荧光值明显高于pc?Ad.mda?7. egfp组。经荧光显微镜观察证实接合物ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp大量分布于A549细胞胞质,而pc?Ad. mda?7.egfp仅出现少量内吞性囊泡。结论成功合成了ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp接合物,并证实ACPP?pc?Ad.mda?7.egfp以非内吞途径进行跨膜运输。
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篇名
可活化细胞穿膜肽-聚N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺-Ad.mda-7.egfp接合物的合成及跨膜运输途径检测
来源期刊
中华生物医学工程杂志
学科
关键词
可活化细胞穿膜肽
N-(2-羟丙基)甲基丙烯酰胺
腺病毒
蛋白质转运
年,卷(期)
2015,(1)
所属期刊栏目
论著
研究方向
页码范围
1-7
页数
7页
分类号
字数
5406字
语种
中文
DOI
10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2015.01.001
五维指标
作者信息
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姓名
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1
张雅洁
510182广州医科大学基础医学院病理学教研室
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李书华
510182广州医科大学基础医学院病理学教研室
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陈艺瑛
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陈婷婷
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李灏
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马少丹
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研究来源
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研究去脉
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期刊影响力
中华生物医学工程杂志
主办单位:
中华医学会
广州医科大学
出版周期:
双月刊
ISSN:
1674-1927
CN:
11-5668/R
开本:
大16开
出版地:
广州市番禺区新造镇广州医科大学新造校区
邮发代号:
46-190
创刊时间:
1995
语种:
chi
出版文献量(篇)
3731
总下载数(次)
14
总被引数(次)
9495
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