神经生长因子在食管鳞癌细胞中的表达及分泌

• 作者: 刘洋 周宗瑶 慕晓玲 李秋霞 王玉婷 裴学莲 黄燕燕
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 医学
• 关键词: 食管鳞状细胞癌 神经生长因子 Eca109细胞 免疫组织化学 反转录-聚合酶链反应 免疫印迹法 酶联免疫吸附法
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 肿瘤生物学
• 页码范围: 348-353
• 分类号: R735.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2015.03.010

摘要

目的 探讨神经生长因子(NGF)与食管鳞癌细胞分化的相关性.方法 采用有限稀释法分选出圆形和梭形单细胞克隆,采用无血清悬浮培养获得细胞球细胞,贴壁的Eca109细胞分别在含血清和不含血清培养基中培养48h;分别采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和免疫印迹法,检测NGF在食管鳞癌细胞中mRNA水平和蛋白水平的表达;免疫荧光技术检测NGF在食管鳞癌细胞中的表达定位;免疫组织化学法检测食管鳞癌组织中NGF的表达定位;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测NGF在Eca109细胞培养基中的分泌情况.结果 在Eca109细胞中能检测到NGF的mRNA水平和蛋白水平的表达,其中NGF在细胞球细胞中的mRNA水平和蛋白水平的表达量最高.食管癌组织中检测到NGF表达于细胞质.Eca109细胞在无血清培养条件下能够分泌NGF,且明显高于含血清培养基中的含量.结论 食管癌细胞系Eca109表达并分泌NGF,并且食管癌组织中表达NGF,NGF可能在维持食管鳞状细胞癌的干细胞特性发挥了重要作用.