日本血吸虫机械脱尾童虫体外转染siRNA的效率研究

• 作者: 林超 潘卫庆 赵静
• 来源期刊: 同济大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 日本血吸虫 机械脱尾童虫 siRNA 转染效率
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1-5
• 分类号: R73
• 字数: 3999字
• 语种: 中文
• DOI: 10.16118/j.1008-0392.2015.03.001

摘要

目的 比较体表渗透法、电穿孔法、脂质体转染试剂LipofectamineTM2 000以及纳米材料聚乙烯亚胺(PEI)4种不同的方法用于日本血吸虫机械脱尾童虫体外转染siRNA的转染效率,以期筛选理想的转染方法.方法 选用携带有红色荧光标记的化学合成siRNA,并且据根不同转染方法说明步骤优化体外转染条件,分别转染日本血吸虫机械脱尾童虫.在一定的时间内利用荧光显微镜观察虫体转染情况并计阳性虫数,并应用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测转入靶基因的mRNA表达情况.结果 经过体外转染条件的优化,电穿孔和纳米材料介导的siRNA转染效率达到了90％以上.应用RT-PCR验证,4种方法中,电穿孔转染法和纳米材料转染的siRNA对靶基因有显著的抑制效应(P＜0.05),电穿孔法转染抑制率达(45±9.63)％,纳米材料转染抑制率达(37±6.17)％.结论 除了常规的电穿孔法,纳米材料作为新型的转染载体,能够有效地传递siRNA进入血吸虫童虫体内,干扰目的基因的表达,这将为日本血吸虫功能基因学的研究提供高效的转染工具.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘卫庆	同济大学生命科学与技术学院	17	52	5.0	6.0
2	赵静	同济大学生命科学与技术学院	42	299	8.0	16.0
3	林超	同济大学生命科学与技术学院	6	10	2.0	3.0