和田羊抗苦马豆素抗体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 王帅 胡建军 贾琦珍 陈根元
• 来源期刊: 塔里木大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 苦马豆素 抗苦马豆素抗体 ELISA检测
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 生物资源研究
• 页码范围: 25-31
• 页数: 7页
• 分类号: S854.4
• 字数: 4209字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0568.2015.04.004

摘要

建立特异性强、敏感性高的和田羊血清抗苦马豆素(Swainsonine,SW)抗体ELISA检测方法.利用自行制备的人工抗原SW-BSA(牛血清白蛋白)免疫接种和田羊,获得SW抗血清后以间接ELISA法检测血清抗体效价,通过分析包被抗原种类、浓度,血清稀释度等指标对检测数据的影响,选择最适条件,确定检测方法.试验表明,以质量浓度为10 μg/mL的SW-卵清蛋白(OVA)偶联抗原作为包被抗原,4℃下包被过夜,质量浓度为20 g/L的明胶封闭,酶标二抗的最佳稀释比为1/1 600,试验条件为37℃温育lh;样品血清最佳稀释比为1/80,试验条件为37℃温育2h,底物最佳显色时间为30 min.建立的抗SW抗体ELISA检测方法,特异性强、稳定性高,为进一步研究SW人工抗原的免疫原性等奠定了基础.