下调miR-21对PDCD4表达及结肠癌HT-29细胞功能的影响研究

• 作者: 任宇鹏 宋纯 张昊
• 来源期刊: 中国癌症杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 结肠癌 增殖 调亡 miR-21 HT-29
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 6-12
• 页数: 7页
• 分类号: R735.53+
• 字数: 4412字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3969.2015.01.002

摘要

背景与目的：miR-21可能通过抑制PDCD4表达调控结肠癌浸润及转移等恶性行为。本研究通过下调miR-21表达后，检测结肠癌HT-29细胞功能的变化，并观察PDCD4在蛋白及mRNA表达水平的改变，探讨miR-21及PDCD4的表达在结肠癌恶性行为中的关系及机制。方法：构建靶向miR-21的干扰质粒simiR-21，转染HT-29细胞后，以实时定量PCR(qRT-PCR)法检测转染效率，MTT法检测转染后细胞增殖变化，流式细胞术检测转染后细胞调亡变化，Transwell检测迁移及浸润能力改变，蛋白质印迹法(Western blot)及qRT-PCR法检测干扰后PDCD4表达水平变化。结果：经qRT-PCR检测simiR-21在HT-29细胞转染效率为60%～65%，转染效率佳；MTT显示转染后72、96和120 h，HT-29增殖能力减弱(t=1.276，P<0.05；t=3.276，P<0.01；t=4.523，P<0.01)；流式细胞术结果显示，与si-negative control及miR-21组对比转染后HT-29调亡率明显增加(t=2.132，P<0.05；t=3.524，P<0.05)；Transwell结果显示，simiR-21转染细胞迁移能力降低(t=2.423，P<0.05；t=3.153， P<0.05)，侵袭能力降低(t=3.245，P<0.05；t=5.236，P<0.05)；Western blot检测结果显示，PDCD4蛋白在simiR-21细胞的表达水平明显上调(t=2.342，P<0.05；t=4.215，P<0.05)；qRT-PCR检测结果显示，PDCD4 mRNA在simiR-21细胞的表达水平明显上调(t=2.261，P<0.05；t=3.492，P<0.05)。结论：simiR-21下调miR-21表达后，结肠癌HT-29细胞增殖能力受抑制，并促进其调亡，抑制迁移及浸润能力，PDCD4上调。miR-21可能通过下调PDCD4表达促进肿瘤细胞恶性行为，可作为结肠癌治疗新的靶向候选基因。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	宋纯	辽宁省肿瘤医院大肠外科	47	238	10.0	13.0
2	张昊	辽宁省肿瘤医院大肠外科	4	21	3.0	4.0
3	任宇鹏	辽宁省肿瘤医院大肠外科	7	59	4.0	7.0