microRNA-7基因敲减对小鼠CD4＋SP细胞胸腺发育的影响

• 作者: 张忆雄 徐林 朱顺飞 秦娜林 赵娟娟 郭萌萌 陈超 陶弋婧
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 微小RNA-7 基因敲减 胸腺 CD4+SP细胞
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 1173-1177
• 页数: 5页
• 分类号: R392
• 字数: 3558字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-484X.2015.09.005

摘要

目的：研究microRNA-7（ miRNA-7，miR-7）基因敲减对小鼠CD4＋SP细胞胸腺发育的影响。方法：检测miR-7基因敲减（miR-7 knock down，miR-7KD）和野生型（Wild-type，WT）小鼠胸腺重量及细胞总数变化；HE染色观察miR-7KD小鼠胸腺的形态学结构改变；FACS检测胸腺CD4＋单阳性（Single positive，SP）细胞的比例并计算细胞总数，同时检测CD4＋SP细胞CD44及CD62L表达变化；核抗原Ki-67染色法检测CD4＋SP细胞的增殖情况；FACS检测CD4＋SP细胞的凋亡变化；Western blot 技术检测胸腺中总ERK1／2和磷酸化ERK1／2表达水平变化。结果：与WT小鼠相比，miR-7KD小鼠胸腺体积、重量以及细胞总数均显著减少，且形态学结构发生改变（ P＜0.05）；FACS结果显示，miR-7KD小鼠胸腺CD4＋SP细胞比例明显降低，且细胞总数减少（ P＜0.05）。此外，CD4＋SP细胞的CD44表达水平显著增加，而CD62 L表达水平明显减少（ P＜0.05）；同时，CD4＋SP细胞增殖及凋亡比例均显著增加（P＜0.01）；最后，miR-7KD小鼠胸腺中ERK1／2以及磷酸化ERK1／2的表达均明显下调（ P＜0.05）。结论：miR-7基因敲减后可显著影响CD4＋SP细胞的胸腺发育，这可能与细胞活化水平及ERK1／2信号通路改变有关。