G蛋白偶联受体91对早期糖尿病大鼠血视网膜屏障的影响及机制

• 作者: 吴强 李婷婷 胡健艳
• 来源期刊: 中华眼底病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 糖尿病视网膜病变/病理生理学 RNA,小分子干扰 受体,G-蛋白偶联 血管内皮生长因子类 p38丝裂原活化蛋白激酶类 动物实验
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 157-161
• 页数: 5页
• 分类号: R744.1
• 字数: 4815字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1005-1015.2015.02.012

摘要

目的 观察G蛋白偶联受体91(GPR91)对早期糖尿病大鼠血视网膜屏障(BRB)的影响及可能的作用机制.方法 构建GPR91小发夹RNA(shRNA)慢病毒载体pGCSIL-GFP-shGPR91及相应的慢病毒空载体pGCSIL-GFP-shScrambled.健康雄性Sprague-Dawley大鼠60只,随机分为对照组(A组)、糖尿病链脲佐菌素(STZ)组(B组)、空病毒LV.shScrambled组(C组)、病毒LV.shGPR91组(D组),每组均为15只大鼠.大鼠STZ腹腔注射2周后,C组大鼠玻璃体腔注射浓度为1×108 TU/ml的空载体病毒1μl;D组大鼠玻璃体腔注射浓度为1×108 TU/ml的pGCSIL-GFP-shGPR91慢病毒1 μl.注射后12周,免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组大鼠视网膜中GPR91及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的表达和激活情况.苏木精-伊红染色和伊凡思蓝(EB)渗漏试验观察大鼠视网膜微血管结构改变和渗漏情况.酶联免疫吸附试验(ELISA)检测视网膜中血管内皮生长因子(VEGF)表达情况.结果 免疫组织化学染色可见GPR91主要表达于大鼠视网膜神经节细胞层;Western blot检测结果显示,D组GPR91表达较C组显著降低,差异有统计学意义(F=39.31,P＜0.01).光学显微镜观察发现,B、C组大鼠视网膜内层毛细血管较A组大鼠视网膜内层毛细血管明显扩张,D组大鼠视网膜内层扩张的毛细血管显著改善.EB渗漏试验结果显示,D组大鼠视网膜EB渗漏量较C组下降(33.8±4.11)％,差异有统计学意义(F=30.35,P＜0.05).ELISA检测结果显示,B、C组大鼠视网膜VEGF蛋白表达较A组明显增加;D组大鼠视网膜VEGF蛋白表达较C组显著下降,差异有统计学意义(F=253.15,P＜0.05).Westernblot检测结果显示,B组大鼠视网膜细胞外信号调节激酶(ERK) 1/2、c-jun氨基末端激酶、p38 MAPK通路均激活,B组各比值与A组比较,差异有统计学意义(q=6.38、2.94、3.45,P＜0.05).D组中p-ERK1/2与t-ERK1/2的比值较C组显著降低,差异有统计学意义(F=22.50,P＜0.05).结论 GPR91受体shRNA玻璃体腔注射可改善早期糖尿病大鼠视网膜BRB损伤;GPRg1受体可能通过激活ERK1/2信号通路参与调控早期糖尿病视网膜中VEGF的表达及BRB的损伤.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李婷婷	上海交通大学附属第六人民医院眼科	31	81	5.0	8.0
2	吴强	上海交通大学附属第六人民医院眼科	138	590	11.0	15.0
3	胡健艳	上海交通大学附属第六人民医院眼科	10	43	3.0	6.0