胰岛素样生长因子Ⅰ/细胞外信号调节激酶通路在肺纤维化中的作用及可能机制

• 作者: 代华平 姜丁源 徐雪峰 朱敏 李淑红 耿菁 黄骁舾
• 来源期刊: 中华医学杂志
• 关键词: 肺纤维化 胰岛素样生长因子Ⅰ 细胞外信号调节激酶 基质金属蛋白酶类
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 1615-1618
• 页数: 4页
• 字数: 3325字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0376-2491.2015.20.017

摘要

目的 探讨胰岛素样生长因子Ⅰ (IGF-Ⅰ)/细胞外信号调节激酶(ERK)通路在肺纤维化中的作用及可能机制.方法 以肺泡上皮细胞A549为研究对象.酶联免疫吸附(ELISA)法检测0、50、100 ng/ml IGF-Ⅰ对细胞培养上清液中基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9浓度的影响;用ERK特异抑制剂对IGF-Ⅰ诱导细胞MMP-2和MMP-9的表达进行阻断实验,分3组:空白对照组(未加IGF-Ⅰ刺激组)、IGF-Ⅰ刺激组、ERK抑制剂+IGF-Ⅰ刺激组.Western印迹法检测各组细胞中ERK的磷酸化(p-ERK)情况.分别用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测各组细胞MMP-2和MMP-9的mRNA水平和上清液中的蛋白浓度.结果 相对于0 ng/ml IGF-Ⅰ组,50、100 ng/ml IGF-Ⅰ可上调肺泡上皮细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9的浓度[(18.30±0.11、21.80±0.09)比(13.52 ±0.19)ng/ml和(0.34±0.叭、0.39±0.01)比(0.25±0.01) ng/ml,均P＜0.001],且100 ng/ml IGF-Ⅰ组中二者浓度均高于50 ng/ml IGF-Ⅰ组(均P＜0.01);IGF-Ⅰ刺激组中p-ERK1/2蛋白的相对表达量高于空白对照组(0.40±0.01比0.23±0.02,P＜0.05),ERK抑制剂+IGF-l刺激组中p-ERK1/2蛋白相对表达量低于IGF-Ⅰ刺激组(0.14±0.03比0.40±0.01,P＜0.01);相对于IGF-Ⅰ刺激组,ERK抑制剂+ IGF-Ⅰ刺激组抑制了MMP-2和MMP-9的mRNA水平(0.88±0.03比1.17±0.05和0.82±0.23比1.81 ±0.27,P＜0.05)和降低了细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9的蛋白浓度[(21.70±0.32)比(29.15±0.34)ng/ml和(0.22±0.01)比(0.29±0.01) ng/ml,均P＜0.01].结论 IGF-Ⅰ可能是通过活化ERK信号通路上调肺泡上皮细胞MMP-2和MMP-9的表达,从而导致肺泡基底膜被破坏,最终促进了肺纤维化的发生.