5-氮杂胞苷和顺铂联合TRAIL诱导肺癌A549细胞凋亡及其机制探讨

• 作者: 欧阳学农 王文武 石斌 綦晓艳 陈曦
• 来源期刊: 肿瘤
• 学科: 医学
• 关键词: 癌,非小细胞肺 氮杂胞苷 顺铂 TNF相关凋亡诱导配体 细胞凋亡 DNA甲基化 死亡受体4
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 858-865
• 页数: 8页
• 分类号: R734.2
• 语种: 中文
• DOI: 10.3781/j.issn.1000-7431.2015.11.156

摘要

目的:探讨5-氮杂胞苷、顺铂联合肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)诱导人非小细胞肺癌A549细胞凋亡的作用及可能的分子机制.方法:用5-氮杂胞苷单药、TRAIL单药、5-氮杂胞苷+TRAIL以及5-氮杂胞苷+顺铂+ TRAIL联合用药分别作用A549细胞后,采用MTT法和FCM法分别检测细胞增殖抑制率和细胞凋亡率.采用RT-PCR和蛋白质印迹法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中死亡受体4(death receptor 4,DR4)mRNA及蛋白表达量的变化.甲基化特异性PCR(methylation-specificPCR,MSP)法检测5-氮杂胞苷处理前后A549细胞中DR4基因的启动子甲基化状态.结果:5-氮杂胞苷+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于TRAIL单药组(P值均＜0.05),而5-氮杂胞苷+顺铂+TRAIL组A549细胞的增殖抑制率及凋亡率均明显高于5-氮杂胞苷+TRAIL组(P值均＜ 0.05).A549细胞在经5-氮杂胞苷处理前,其DR4基因启动子呈甲基化状态,DR4 mRNA及蛋白表达水平均较低;经5-氮杂胞苷处理后,DR4基因启动子呈非甲基化状态,DR4表达水平明显提高,并呈时间依赖性(P值均＜ 0.05).结论:5-氮杂胞苷可以逆转DR4基因启动子的甲基化状态,使其表达上调,增强TRAIL诱导A549细胞凋亡的作用,逆转细胞对TRAIL的耐药性.同时,亚毒性剂量的顺铂可进一步增强TRAIL对A549细胞的凋亡诱导作用.提示5-氮杂胞苷、顺铂联合TRAIL可能成为治疗肺癌的一种新策略.