体外转染Cyclin A2基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响

• 作者: 卢杏 常玉巧 张进忠 徐振平 贾银明 郭志坤
• 来源期刊: 解剖学报
• 学科: 生物学
• 关键词: Cyclin A2 心肌细胞 增殖 基因转染 免疫荧光 大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 细胞和分子生物学
• 页码范围: 57-62
• 分类号: Q28
• 语种: 中文
• DOI: 10.16098/j.issn.0529-1356.2015.01.010

摘要

目的 探讨体外转染细胞周期素A2(Cyclin A2)基因对原代大鼠心肌细胞增殖的影响,为心脏再生提供细胞学依据.方法 SD乳鼠12只,分离、培养、鉴定原代乳鼠心肌细胞并分为3组,实验组:转染带有强化绿色荧光蛋白(GFP)和Cyclin A2基因的重组腺病毒(Ad-Cyclin A2-GFP);空病毒组:转染不含目的基因带有GFP的重组腺病毒(Ad-Null-GFP);阴性对照组:未做转染处理,仅加入等量的培养基.利用GFP示踪技术,评估原代心肌细胞转染效率;转染后的细胞继续体外培养3 ～5d,利用免疫荧光技术分别检测Cyclin A2、磷酸化组蛋白H3(H3P)、心肌肌钙蛋白-T(cTnT).结果 1.荧光GFP示踪表明原代心肌细胞的转染效率高达(97±0.74)％;2.免疫荧光标记显示,空病毒组和对照组结果相似;心肌细胞特异性标记蛋白cTnT分布于细胞质,原代心肌细胞纯度高达(95±0.62)％;心肌细胞CyclinA2主要在胞核内聚集,少数分布于细胞质.H3P为核蛋白在细胞核内分布.3.转染Cyclin A2后,实验组H3P阳性率明显高于空病毒组和对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05);实验组可见大量多核细胞,以双核为主,伴少量3核细胞.结论 腺病毒作为转染载体对原代心肌细胞有很好的侵染效率;Cyclin A2超表达促进原代心肌细胞形成双核.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭志坤	新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室	208	719	10.0	16.0
2	常玉巧	新乡医学院河南省医用组织再生重点实验室	23	37	3.0	5.0
3	贾银明	安阳市中医院心内科	8	46	4.0	6.0
4	卢杏	新乡医学院生命科学技术学院	3	7	1.0	2.0
13	张进忠	河南医学高等专科学校基础医学部生物学教研室	5	3	1.0	1.0