丰水梨多酚氧化酶基因的克隆与原核表达

• 作者: 刘仲华 李勤 李娟 王坤波 陈东生 黄建安
• 来源期刊: 茶叶科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 多酚氧化酶 基因克隆 原核表达 酶促合成 茶黄素
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 页码范围: 17-23
• 页数: 7页
• 分类号: Q946.5|Q52
• 字数: 3851字
• 语种: 中文

摘要

通过PCR方法克隆丰水梨PPO基因全长，并将其登录Genebank，登录号JQ861265。基因全长1782 bp，无内含子，编码的 PPO 属于亲水性蛋白质，无跨膜结构，含有593个氨基酸，分子量约为65.8 kDa，理论等电点为8.4。N端含有一段由47个氨基酸组成的转运肽。去除转运肽的成熟 PPO分子量为60.8 kDa，理论等电点为6.69。PPO中含有两个铜离子结合区，主要位于 PPO二级结构中的α-螺旋区域中。原核诱导目的蛋白在诱导3~6 h后积累量较大。诱导蛋白（PPO前体和成熟PPO）均能氧化儿茶素形成茶黄素。