法氏囊活性五肽BP5的抗肿瘤作用

• 作者: 吴庭才 李小康 李德元 王臣 郭香玲 陈溥言
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 医学
• 关键词: Bursopentin(BP5) 鸡DT40细胞 T7噬菌体cDNA文库 相互作用蛋白 p53信号通路 抗肿瘤
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 235-245
• 分类号: R392
• 语种: 中文
• DOI: 10.13343/j.cnki.wsxb.20140380

摘要

[目的]法氏囊活性五肽Bursopentin(BP5)是一种多功能生物学活性因子,不仅具有免疫调节和抗氧化功能,还具有抗肿瘤活性.目前,BP5发挥抗肿瘤生物功能的作用机制尚不清晰.[方法]本研究利用T7噬菌体展示技术构建鸡DT40细胞T7噬菌体cDNA文库,以BP5-BSA为靶分子对文库进行亲和淘选,通过序列测定和生物信息学分析,获得BP5的结合蛋白.通过分析BP5诱导的鸡DT40细胞mRNA基因表达谱和检测BP5对HCT116细胞中p53 Luciferase活性和p53信号通路中相关蛋白表达的影响来探讨BP5抗肿瘤的作用机制.[结果]构建的鸡DT40细胞T7噬菌体cDNA文库原始滴度为1.2×104 pfu/mL,重组率为91.7％,扩增后滴度为1.9×109 pfu/mL;通过生物淘选获得3条与BP5结合的鸡源蛋白血管内皮生长因子A (vascular endothelial growth factor A)、细胞周期蛋白E1 (cyclin E1)和运输蛋白颗粒复合体2(trafficking protein particle complex 2).基因表达谱分析结果显示,BP5参与调节多条与抗肿瘤功能有关的通路,其中包括p53信号通路,且p53信号通路涉及的5个差异表达基因均与细胞周期调控或抗肿瘤相关,其中SIAH1、TP53 (p53)、CIP1(p21)基因被上调,CHEK2、CCNE1基因被下调.RT-PCR方法检测10个表达水平有明显变化的差异基因,其结果与基因芯片分析结果相符;BP5对p53 Luciferase活性的影响实验结果显示,BP5在0.2-20μg/mL浓度下能够明显提高HCT116细胞中p53相对Luciferase活性,Western blotting结果证实,BP5能显著促进p53、p21蛋白的表达水平,而CCNE1和CHEK2蛋白的表达水平则明显降低.[结论]本研究结果表明BP5通过p53信号通路途径发挥其抗肿瘤生物学功能,为进一步研究BP5抗肿瘤具体的分子机制提供了参考依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物细菌学重点实验室	269	2875	28.0	40.0
2	吴庭才	河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室	107	550	13.0	19.0
3	王臣	河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室	45	95	5.0	8.0
4	李小康	河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室	19	63	4.0	7.0
5	郭香玲	河南科技大学兽医肿瘤免疫学重点实验室	8	45	3.0	6.0
6	李德元	南京农业大学农业部动物细菌学重点实验室	7	47	3.0	6.0