靶向沉默转化生长因子β1表达的短发夹 RNA的筛选

• 作者: 付琳琳 付素珍 吴余 唐小燕 李敏 李新强 王虹
• 来源期刊: 郑州大学学报（医学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 肾小管-肾间质纤维化 上皮细胞-间充质转分化 转化生长因子β1 短发夹RNA
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: ? 论著?
• 页码范围: 61-64,65
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3413字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6825.2015.01.017

摘要

目的：筛选可靶向沉默转化生长因子β1（TGF－β1）表达的短发夹RNA（shRNA）。方法：设计和制备靶向沉默TGF－β1的5条shRNA，并构建靶向沉默TGF－β1的p－Genesil－shRNA真核表达重组质粒及含无关shRNA的 p－Genesil－1－shRNA－vect对照质粒，酶切和测序方法进行鉴定。通过脂质体介导分别将p－Genesil－1－shRNA－vect质粒和各重组表达质粒转染入高糖或AngⅡ环境激活的HKC细胞（分别命名为p－Genesil－1－vect细胞及p－Genesil－shRNA 1～5细胞），Western blot方法检测沉默TGF－β1表达的效果。结果：酶切和测序结果显示，5种重组质粒均可切出与预计相符的目的片段，所有shRNA编码序列与设计一致。与HKC细胞相比，高糖或AngⅡ刺激的HKC细胞和p－Genesil－1－vect细胞中TGF－β1表达均增高（F＝74．188，P＜0．001），而后二者之间TGF－β1表达差异无统计学意义（P＞0．05）。与高糖或AngⅡ刺激的p－Genesil－1－vect细胞相比，高糖或AngⅡ刺激的各组p－Genesil－shRNA细胞中TGF－β1表达均降低（F＝139．695，P＜0．001）。结论：筛选出1条可靶向沉默TGF－β1表达的shRNA。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李新强	新乡医学院病理学教研室	20	98	5.0	9.0
2	付琳琳	新乡医学院病理学教研室	3	14	2.0	3.0
3	吴余	新乡医学院病理学教研室	3	14	2.0	3.0
4	王虹	新乡医学院病理学教研室	2	6	2.0	2.0