棉铃虫转录因子c-Myc基因在滞育和非滞育蛹脑中的表达分析及多克隆抗体制备

• 作者: 徐卫华 陈伟
• 来源期刊: 昆虫学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 棉铃虫 滞育 转录因子 c-Myc 多克隆抗体 Wnt/β-catenin信号通路
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 生理与生化
• 页码范围: 115-121
• 分类号: Q966
• 语种: 中文
• DOI: 10.16380/j.kcxb.2015.02.002

摘要

[目的]c-Myc是近年来研究较多的转录因子,也是受Wnt/β-catenin信号通路调节的重要靶标.本研究旨在克隆棉铃虫Helicoverpa armigera c-Myc基因,从核酸水平初步调查c-myc在滞育和非滞育蛹脑中的表达情况,同时制备其蛋白的多克隆抗体.[方法]通过RACE方法克隆棉铃虫c-myc基因的cDNA,运用RT-PCR方法比较滞育和非滞育蛹脑中Har-c-myc基因的表达情况.根据获取的序列构建原核表达载体,在大肠杆菌Escherichia coli中进行表达,纯化后免疫新西兰兔,制备了多克隆抗体.[结果]克隆了棉铃虫c-myc基因,核酸水平的研究表明滞育蛹脑中c-myc表达水平明显低于非滞育蛹脑.成功地在大肠杆菌中表达了c-Myc部分肽段并通过镍柱纯化获得了较纯的重组蛋白.制备的c-Myc抗体效价达到了1∶125 000.[结论]滞育蛹脑中Har-c-myc的表达下调.获得了抗棉铃虫c-Myc的多克隆抗体.本研究的成果为后续进一步深入研究棉铃虫Wnt/β-catenin信号通路在棉铃虫发育中的作用奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈伟	广东药学院生命科学与生物制药学院广东省生物技术候选药物研究重点实验室	20	51	4.0	6.0
2	徐卫华	中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室	12	108	3.0	10.0