一种高效扩增血清松弛环状乙型肝炎病毒DNA全长基因组方法的研究

• 作者: 张纯瑜 董辉 金维荣
• 来源期刊: 空军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 松弛环状乙型肝炎病毒DNA 全长基因组 扩增 滚环复制
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 论著?普通医学
• 页码范围: 147-150
• 页数: 4页
• 分类号: R512.6+2
• 字数: 3920字
• 语种: 中文

摘要

目的：建立基于滚环复制的、高效扩增血清松弛环状乙型肝炎病毒DNA（HBV RC-DNA）全长基因组的方法。方法以60例慢性乙型肝炎患者血清HBV RC-DNA为研究对象，利用T4 DNA polymerase和T4 DNA ligase，封闭HBV RC-DNA基因组上的缺口，使之成为闭合环状结构；再通过Phi29 DNA polymerase的作用，对闭合环状的HBV基因组进行滚环复制，以滚环复制后的RC-DNA为模板扩增HBV全长基因组。结果成功建立了基于滚环复制的HBV RC-DNA全长基因组扩增方法，可从病毒载量为108~104拷贝/ml样本中扩增出HBV全长基因组。对于107~105拷贝/ml血清样本来说，使用基于RC-DNA滚环复制的全长基因组扩增方法，与以往的一步法扩增相比，扩增效率显著提高。结论基于滚环复制的HBV RC-DNA全长基因组扩增方法具有较高的灵敏度。该方法的建立为H BV全基因组研究提供了一种新的、有效的工具，有望在基础和临床研究中广泛应用。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张纯瑜	解放军第180医院南京军区临床肝病中心	14	65	4.0	8.0