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摘要:
构建人FGF21(fibroblast growth factor,FGF)cDNA的原核表达载体并诱导其重组蛋白表达。提取人肝脏总RNA后,经RT-PCR扩增获得目的片段,构建其T载体进行保存。再构建重组原核表达载体pET-28a(+)-hFGF21,重组质粒转化至大肠杆菌菌株BL21(DE3)中,在IPTG诱导下得到可溶性表达,采用亲和层析法纯化表达产物后,进行Western blot鉴定。成功构建重组质粒pET-28(+)-hFGF21,对其进行可溶性表达后成功纯化出his-hFGF21,经Western blot鉴定该融合蛋白可与FGF21抗体特异性结合。成功构建pET-28(+)-hFGF21,并可溶性表达his-hFGF21蛋白。
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文献信息
篇名 人FGF21原核表达载体的构建及重组蛋白表达
来源期刊 生物技术通报 学科
关键词 人成纤维细胞生长因子(FGF21) 克隆 原核表达 蛋白纯化
年,卷(期) 2015,(3) 所属期刊栏目 研究报告
研究方向 页码范围 218-222
页数 5页 分类号
字数 语种 中文
DOI 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.04.032
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 雷霆雯 贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室 34 151 8.0 10.0
2 许庆忠 贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室 15 108 8.0 10.0
3 李红梅 贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室 25 96 6.0 8.0
4 张礼林 贵阳医学院生物化学与分子生物学教研室 4 1 1.0 1.0
5 唐青蓝 海南省第三人民医院检验科 9 23 4.0 4.0
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人成纤维细胞生长因子(FGF21)
克隆
原核表达
蛋白纯化
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