奶牛结核病IFN-γ基因的克隆及其在E.coli BL21(DE3)中的高效表达

• 作者: 周峰 尚立宏 曹丽萍 王佳 豆思远 豆玲 鄂承钧
• 来源期刊: 畜牧兽医杂志
• 关键词: 奶牛 结核病 IFN-γ基因 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 试验研究
• 页码范围: 18-21
• 页数: 4页
• 分类号: S852.61+8
• 语种: 中文

摘要

动物机体内γ-干扰素(IFN-γ)是可被多种物质诱导产生的生物活性蛋白,克隆和诱导表达奶牛结核病IFN-γ蛋白,对于采用ELISA诊断牛结核病有着重要意义.本研究利用RT-PCR方法克隆了奶牛结核病IFN-γ基因,并成功构建了IFN-γ基因的原核表达载体重组质粒pET28a-IFN-γ,转入E.coli BL21 (DE3)中进行诱导表达,并对条件进行了优化.SDS-PAGE与West-ern Blot结果显示,在37℃条件下,0.75mmol/L IPTG诱导4h可见重组蛋白BovIFN-γ大量表达.本研究成功建立了利用原核表达系统获得牛IFN-γ蛋白的方法,对后续利用该蛋白作为免疫原,从而建立ELISA诊断方法奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹丽萍		11	54	4.0	7.0
2	王佳		40	62	4.0	5.0
3	周峰		29	42	4.0	5.0
4	豆思远		22	48	4.0	6.0
5	鄂承钧		6	15	2.0	3.0
6	豆玲		11	19	2.0	3.0
7	尚立宏		13	19	3.0	4.0