3种 DNA 甲基化定量分析方法的比较

• 作者: 周在威 路兆宁 颜景斌 马晴雯
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 焦磷酸测序 克隆测序 DNA 甲基化芯片 甲基化修饰
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 84-89
• 页数: 6页
• 分类号: Q31
• 字数: 4132字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2015.02.005

摘要

目的：比较特定基因区域 DNA 甲基化检测方法的优缺点。方法采用焦磷酸测序、克隆测序和DNA 甲基化芯片等3种 DNA 甲基化检测方法，对7例唐氏综合征和5例正常对照样本的 PRDM8内含子7 CpG 岛中的部分序列进行甲基化检测。从准确度、重复性和精确度(分辨率)等方面来比较3种方法，探讨哪种方法更适合特定基因的 DNA 甲基化水平定量检测。结果①焦磷酸测序可在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平，结果重复性好，准确度高，而且能发现样本中 CpG 位点甲基化水平变化的规律；②克隆测序也可在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平，但结果重复性较差，无法发现 CpG 位点甲基化水平变化的规律；③甲基化芯片可通过所测区域的两个探针来判断样本间甲基化水平的差异，但无法在单碱基水平定量检测样本的甲基化水平；④上述3种方法检测结果之间存在一定的差异，但是样本间甲基化水平总体趋势基本一致。此外，唐氏综合征样本的甲基化水平高于正常对照样本。结论焦磷酸测序准确度高、重复性好、费用较低、操作较为简单快捷，更为适合在单碱基水平检测特定基因区域的 DNA 甲基化水平。