猪圆环病毒2型ORF2基因在Sf9细胞中表达及免疫原性研究

• 作者: 尹秀凤 张小飞 徐延伟 朱鹏
• 来源期刊: 畜牧与兽医
• 学科: 农学
• 关键词: 猪圆环病毒2型 重组Cap蛋白 免疫原性 中和活性
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 兽医科技
• 页码范围: 85-88
• 页数: 4页
• 分类号: S852.6
• 字数: 3817字
• 语种: 中文

摘要

利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统表达猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳(Cap)蛋白.将优化合成的PCV2ORF2基因克隆到杆状病毒转移载体pFastHTA中,并将鉴定正确的重组质粒pFastHTA-Cap2转化至大肠杆菌感受态细胞,经蓝白斑筛选得到含有目的基因的重组杆状病毒质粒(rBac-Cap2),转染至Sf9细胞,获得重组杆状病毒,对感染重组杆状病毒的细胞培养物进行重组蛋白的表达,进行SDS-PAGE和Western blot分析,并对表达的重组蛋白进行小鼠免疫试验及其病毒血清中和试验.SDS-PAGE分析表明,优化合成的PCV2ORF2基因得到表达,蛋白分子质量大小为33 ku; Western blot证实重组蛋白能够识别抗PCV2阳性血清,表明重组蛋白具有反应原性;小鼠免疫试验结果显示,该蛋白能刺激机体产生特异性抗体,具有较好的免疫原性;病毒血清中和试验证实,抗PCV2 Cap血清抗体具有中和病毒的活性,中和效价为1:42.该蛋白在杆状病毒系统中的成功表达,为PCV2感染的诊断及亚单位疫苗的研制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张小飞	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	33	213	8.0	13.0
2	尹秀凤	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	30	141	7.0	10.0
3	徐延伟	南京天邦生物科技有限公司生物技术研究所	5	31	3.0	5.0
4	朱鹏	安徽农业大学动物科技学院	3	19	2.0	3.0