色氨酸W129在匍枝根霉内切葡聚糖酶EGⅡ降解纤维素过程中的作用

• 作者: 周若飞 李松 汤斌 韦兰芳
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 关键词: 匍枝根霉 内切葡聚糖酶 色氨酸 结构与功能 定点突变
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 字数: 3400字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13995/j.cnki.11-1802/ts.201504004

摘要

通过对匍枝根霉(Rhizopus stolonifer)内切葡聚糖酶EGII进行结构功能分析,发现其活性中心入口处的色氨酸W129在水解纤维素的过程中起着关键作用.对该位点进行定点突变(W129A),并研究了它对EGII和催化区(CD)的影响.经原核表达及纯化,获得目的蛋白EGII-W129A和CD-W129A.酶学特性研究结果显示,重组蛋白的比酶活、kcat和kcat/Km均低于EGII和CD,比酶活分别下降了23.8％和35.7％,同时Km值均有所提高.W129A导致酶与底物的亲和力和催化效率下降,使酶活力降低的原因主要是其减弱了活性中心入口处纤维素链的“载入”效率,即Trp129在EGII水解纤维素过程中起到加载纤维素链的重要作用.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	汤斌	安徽工程大学微生物发酵安徽省工程技术研究中心	104	726	16.0	22.0
2	李松	安徽工程大学微生物发酵安徽省工程技术研究中心	27	36	4.0	5.0
3	周若飞	安徽工程大学微生物发酵安徽省工程技术研究中心	2	2	1.0	1.0
4	韦兰芳	安徽工程大学微生物发酵安徽省工程技术研究中心	1	0	0.0	0.0