不同方法保存的患病异育银鲫中鲤疱疹病毒2型DNA 提取和 PCR 扩增效果分析

• 作者: 卢俊 岳蒙蒙 操艮萍 陆宏达
• 来源期刊: 淡水渔业
• 学科: 农学
• 关键词: 异育银鲫(Carassius auratus gibelio) 鲤疱疹病毒2型 保存 DNA提取 PCR
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 53-58,101
• 页数: 7页
• 分类号: S943.117
• 字数: 6234字
• 语种: 中文

摘要

以患鲤疱疹病毒2型（Cyprinid herpesvirus 2， CyHV－2）疾病的异育银鲫（Carassius auratus gibelio）肾脏为实验材料，采用－20℃冷冻、100％乙醇、 Dafano′s 液、10％福尔马林、 Zenker′s 液、 Müller′s 液、2.5％戊二醛、 Hel－ly′s 液、 Mossman′s 液、 Bouin′s 液和 Carnoy′s 液不同方法进行保存，通过微量分光光度计检测和琼脂糖凝胶电泳探讨不同保存方法对病毒 DNA 提取效果、常规 PCR 扩增效果和巢式 PCR 扩增效果的影响。结果表明：从病鱼肾脏中提取 DNA 时，除100％乙醇保存方法与－20℃冷冻保存组一样可以提取高质量的 DNA 外，其它保存方法对 DNA 提取有不同程度的影响，100％乙醇保存方法和保存的材料可以用作于鲤疱疹病毒2型 DNA 的提取；常规 PCR 扩增时，100％乙醇、 Zenker′s 液、2.5％戊二醛、 Helly′s 液、 Bouin′s 液和 Carnoy′s 液保存方法与－20℃冷冻保存组具有相同的效果，在362 bp 处出现明亮一致的清晰单一目的条带，这6种保存方法及其保存的材料可以用作鲤疱疹病毒2型的常规 PCR 扩增；巢式 PCR 扩增时，100％乙醇、 Dafano′s 液、10％福尔马林、 Zenker′s 液、 Müller′s 液、2.5％戊二醛、 Helly′s 液、 Mossman′s 液、 Bouin′s 液和 Carnoy′s 液所有保存方法与－20℃冷冻保存组具有相同的效果，在339 bp 处出现明亮一致的清晰单一目的条带，这些保存方法及其保存的材料均可以用作于鲤疱疹病毒2型的巢式 PCR 扩增，在采用巢式 PCR 进行检测和诊断患鲤疱疹病毒2型疾病上具有应用价值。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陆宏达	上海海洋大学水产与生命学院	25	154	6.0	11.0
2	岳蒙蒙	上海海洋大学水产与生命学院	7	14	3.0	3.0
3	操艮萍	上海海洋大学水产与生命学院	5	9	2.0	3.0
4	卢俊	上海海洋大学水产与生命学院	2	1	1.0	1.0