大鼠脑皮质星形胶质细胞的体外优化培养及鉴定

• 作者: 冯改丰 杨维娜 杨蓬勃 王唯析 贾宁 钱亦华 靳辉
• 来源期刊: 西安交通大学学报（医学版）
• 关键词: 星形胶质细胞 大脑皮质 细胞培养 大鼠
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 技术方法研究
• 页码范围: 849-853
• 页数: 5页
• 分类号: Q25
• 语种: 中文
• DOI: 10.7652/jdyxb201506027

摘要

目的：旨在获得高纯度的星形胶质细胞,并对不同培养时期的细胞进行鉴定,为进一步研究奠定基础。方法常规分离新生 SD 大鼠大脑皮质并制备单细胞悬液,采用差速黏附加摇床震荡法对所获得的细胞进行纯化。倒置相差显微镜及 HE 染色观察细胞形态,GFAP 免疫荧光对获得细胞进行鉴定。结果原代培养的皮质细胞从3 d 开始迅速增殖,9~12 d 即可铺满瓶底,此时细胞呈明显的分层生长,星形胶质细胞位于底层,形态多样,阳性率为(67.2±7.1)%；经过1次传代后,GFAP 阳性率有所提升(84.0±6.0)%,但不能完全去除小胶质细胞及少突胶质细胞,细胞仍呈分层生长；至第3次传代后,获得大量几乎为单一种类的星形胶质细胞,其胞体较大、突起较短粗,一般2~3个,胞核圆形或椭圆形,常偏于一侧,GFAP 染色呈强阳性,阳性率可达(97.6±2.4)%。结论通过差速黏附与摇床震荡相结合的方法,获得了高纯度且生长状态良好的星形胶质细胞。