甲基对硫磷水解酶的酿酒酵母表面展示及在甲基对硫磷降解中的应用

• 作者: 池哲 王星星
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 甲基对硫磷水解酶 表面展示 酿酒酵母 甲基对硫磷降解
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 178-184
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.04.026

摘要

PCR扩增假单胞菌WBC-3的甲基对硫磷水解酶基因，插入表面展示质粒pYD1的多克隆位点，构建pYD1-MPH重组质粒。重组质粒转化酿酒酵母EBY100，2%半乳糖诱导甲基对硫磷水解酶表达，并利用免疫荧光检测甲基对硫磷水解酶在酿酒酵母细胞表面的表达展示。研究了表面展示甲基对硫磷水解酶的酶学性质和酵母工程菌对水体中甲基对硫磷的降解效果。结果表明成功构建具有全细胞甲基对硫磷水解酶催化活性的酵母工程菌，经2%半乳糖诱导48 h，表面展示甲基对硫磷水解酶比酶活力为18.2 U/mg细胞干重。表面展示甲基对硫磷水解酶的最适作用pH为9.5，最适作用温度为30℃，在pH4.0-10.5之间和45℃以下稳定性较好，Mn2+、Co2+、Zn2+、Ca2+、Hg2+、K+、Ni2+对表面展示甲基对硫磷水解酶活性有激活作用，Na+、Fe3+、Ag+对展示酶活力有抑制作用。工程菌在1 h内对淡水中20 mg/L的甲基对硫磷的降解率在80%以上。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	池哲		4	15	1.0	3.0
2	王星星		6	4	1.0	1.0