草鱼肝细胞脂变模型的建立及脂代谢基因表达分析

• 作者: 卢荣华 孙君君 李玺洋 杨峰 梁旭方 王敏 白小丽
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 草鱼 肝细胞 脂肪变性 基因表达 脂质代谢 细胞模型
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 24-32
• 页数: 9页
• 分类号: S963
• 字数: 6130字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2015.00212

摘要

为了筛选草鱼肝细胞脂肪变性的最佳诱导剂及浓度,并初步分析脂肪乳剂(lipid emulsions, LE)引起草鱼肝细胞脂肪变性的作用机理,以草鱼(Ctenopharyngodon idellus)正常肝细胞为研究对象,建立草鱼脂肪变性肝细胞模型,以含10%胎牛血清的基础培养液为对照组,处理组为含20%脂肪乳剂0.5~2 mL/L和含20%、50%胎牛血清的诱导培养液,孵育草鱼肝细胞48 h 后,定量分析肝细胞内的甘油三酯(TG)含量,观察脂滴积聚情况及肝细胞超微结构的变化,检测细胞培养上清中谷丙转氨酶(alanine transaminase, ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase, AST)的活性, qRT-PCR技术检测脂代谢关键基因(PPARa、PPARg、SREBP-1c、LPL、Lep和UCP2)的转录水平变化,蛋白质印迹技术检测PPARg、SREBP-1c的蛋白水平变化。结果发现,含1~2 mL/L LE的诱导液组和含20%、50%FBS的诱导液组与对照组相比TG含量均显著上升(P<0.05),且20%FBS和各浓度LE诱导组的转氨酶活性与对照组相比差异不显著(P>0.05),表明含1~2 mL/L LE的诱导液和含20% FBS的诱导液均可建立草鱼营养性脂肪肝细胞模型。在肝细胞脂变模型中, PPARγ和 LPL 等脂代谢基因的表达量显著升高(P<0.05),而 Lep 基因表达量显著降低(P<0.05), PPARγ和SREBP-1c的蛋白水平升高。结论认为：采用1~2 mL/L LE和20%的FBS均可以在短时间内建立草鱼肝细胞脂肪变性模型,含1 mL/L LE的诱导液诱导效果最佳；肝细胞内脂质的蓄积可能与脂肪代谢关键基因PPARγ、SREBP-1c、LPL及Lep等密切相关。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王敏	华中农业大学水产学院	34	289	11.0	16.0
2	李玺洋	华中农业大学水产学院	3	26	2.0	3.0
3	梁旭方	华中农业大学水产学院	21	161	8.0	12.0
4	卢荣华	华中农业大学水产学院	28	58	5.0	7.0
8	孙君君	河南师范大学水产学院	7	33	3.0	5.0
9	杨峰	河南师范大学水产学院	10	38	4.0	6.0
10	白小丽	华中农业大学水产学院	5	33	3.0	5.0